关键词：青霉素酰化酶

行业：医药/高校

CT-1PLUS恒PH滴定测定青霉素酰化酶活性

 

摘要

青霉素酰化酶，又称为青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶。主要从大肠埃希菌胞内酶和巨大芽孢杆菌胞外酶获得，该酶已大规模应用于工业生产β-内酰胺类抗生素的关键中间体和半合成β-内酰胺类抗生素。本试验通过CT-1Plus恒pH滴定来进行青霉素酰化酶活性测试。

 

仪器配置

●CT-1Plus电位滴定仪

●pH-102

●20mL高精度计量管

●100mL滴定杯

 

试剂配置

●滴定剂：氢氧化钠标准溶液

●滴定度：0.1001mol/L 

●溶剂：磷酸盐缓冲溶液

●其它试剂：青霉素钾盐

 

测定方法

●酸碱中和/恒pH滴定

●控制反应体系pH值在8.0，在磷酸缓冲体系中加入一定量的青霉素酰化酶和青霉素钾盐，插入电极和滴定头，选用恒pH滴定方法，用标准氢氧化钠标准溶液进行滴定。

 

仪器参数     

● 最小滴定体积：10μL  

● 最大滴定体积：10μL

● 搅拌速度：200       

● 每滴间隔：800ms

● 终点模式：恒pH   

● 终点设置：8.0

 

测试数据

● 环境温度：20℃ 

● 环境湿度：50% 

● 测试时间：5min

序号	样品量/g	终点体积/mL	测试结果/I.U
1	0.0515	0.1873	72.8

测试结果：该青霉素酰化酶在本次实验条件下的酶活力为72.8 I.U。